为什么杂交品种不能繁殖(为什么杂交后代不可育)
14802023-08-29
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northern印迹杂交(northernblot)。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。DNA印迹技术由Southern于1975年创建,称为Southern印迹技术,RNA印迹技术正好与DNA相对应,故被称为northern印迹杂交,与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为Westernblot。
整合到植物染色体上的外源基因如果能正常表达,则转化植株细胞内有其转录产物——特异mRNA的生成。将提取的植物总RNA或mRNA用变性凝胶电泳分离,则不同的RNA分子将按分子质量大小依次排布在凝胶上;将他们原位转移到固定膜上;在适宜的离子强度及温度条件下,用探针与膜杂交;然后通过探针的标记性质检测出杂交体。若经杂交,样品无杂交带出现,表明外源基因已经整合到植物细胞染色体上,但在该取材部位及生理状态下该基因并未有效表达。
印迹杂交的步骤如下:
(1)酶切DNA,凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。
(2)将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。
(3)预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。
(4)让探针与同源DNA片段杂交,然后漂洗除去非特异性结合的探针。
(5)通过显影检查目的DNA所在的位置。
RNA印迹杂交,是指检测、定量mRNA大小及在组织中表达水平的标准方法。既是能直接提供有关RNA完整性、不同的剪接信息及mRNA大小等信息的唯一方法,也是在同一张膜上直接比较同一信息在不同样品中的表达丰度的首选方法。RNA印迹杂交由斯坦福大学的G.Stark于1975年发明。其原理是在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,继而按照与DNA印迹杂交相同的原理进行转膜和用探针进行杂交检测。
命名为RNA印迹杂交是因为其原理与萨瑟恩发明的DNA印迹杂交原理相:似,实验过程也相似,所以取了一个类似的名字i叫RNA印迹杂交。
老梁有句话说辽宁奸,龙江虎,中间夹个二百五。呵呵,不知道东北人听到此句有何感觉,愤怒吗?其实真没有,因为东北人就这么喜欢自我调侃。
走过黑龙江大部分地方,接触过很多黑龙江人,就谈谈这些人吧。
最初接触到黑龙江人是在大连,九十年代,大部分是弃田的农民,矿区下岗的工人,这些人当时在大连很不受待见。如果人少还可以,但人多爱喝酒闹事,这种现象在山东也普便。青岛,烟台,威海也到处黑龙江人。这些人现都已年近半百,估计早已融于当地社会,是这些城市崛起发达之初的最底层的建设者,吃过吃不了的苦,现在享福吗?还在感受外乡人的孤独吗?
零几年第一次去黑龙江,位置五常,秋天。从哈尔滨开始我第一次感觉到天与地的辽阔,空旷,粗犷,当然还有人的豪爽。有一次车於在泥水里动不了了,前不着村,后不着店。好久过来了一个拖拉机,我马上跑去喊帮忙。那个师傅先熏我说啥道都敢开,然后就帮我拖,很给力,立马解决问题。这时我才意识到因为着急还没谈价钱,也听说过黑龙江人黑,于是赶紧掏出一百元主动奉上怕被动了人家喊出价不好办。但人家却无论如何不收,只说举手之劳,关键也是救援太快太顺利(他们不会小病大治)。还有一次迷路,路边有几个老人,我就去打听,我的语速有点快且带口音(真实我们还真一直认为我们说的就是普通话呢),对方竟故意让我重复好几次,之后才指出路,最后还哈哈大笑说以后说话把舌头捋直了。呵呵,原来在逗我玩,但是指的方向肯定没错。这就是黑龙江人的特点,任何时候都找点乐子,爱开玩笑。当然也有些地区人对此不屑,我曾怼过他们:开不起玩笑,不自信,玩不了幽默,没文化。
当我回哈尔滨时约了同学,那热情都给我烫化了。吃完上顿喝下顿,撑饱肚子打着嗝,喝完晃荡着逛中央大街,排着长队等着给我买秋林的红肠,肚等。后来我又认识了一些黑龙江朋友,我总结了一个处事方法。必须低调,否则吃饭撑死你,喝酒喝趴下,别提什么特产好。这是一群仅存的最纯朴的人之一了,但你千万别起坑人之心,别做坏人之事,否则这些″虎”人一定让你体会到黑龙江有多黑。
黑龙江人有″大哥″文化。哪个地区都有社会大哥。但其实大部分都不是黑社会。只有转遍黑龙江才会发现明白为什么这样。黑龙江太大,又人口稀有,在通讯交通不发达时代,如果想与外沟通,交流,没有一个值得信赖又有影响力的人真不行。但是不讲武德只讲武功绝对不好使。
但黑龙江人确实虎。很多时候他们办事不看成本,不计代价,因此很多时候不赚啥钱。所以,若你没坑他,即使赔钱他们也会坦然接受,照样大口吃肉,大碗喝酒招待你。但若他们赔钱是因为遭算计,这可要坏事。
还有,黑龙江人有些人爱耍小聪明,毕竟还是偏远闭塞,有些人竟以为自己知道而别人不知道,当然,觉无坏人之心。
最后说一下黑龙江女人。我可以负责任的说一句,绝对美女,肤白。当你走在哈尔滨的大街上,很少看见皮肤有点黑的,若有,大概率是外地人。还有她们的泼辣,豪爽,娘一点的男人一定受不了,但若能接受,不仅仅是艳福而已。当你受欺负,拎着砖头一定跟你冲上去。
题尾,突然想,也许倒退多少年,老梁应该说:南方奸,北方虎,中间是个二百五。然今天,奸风已至辽,渐北,若干年后,这些二百五和虎子还会在吗?交通,通讯,网络还会为这片黑土地留下那原始的气息吗?七普刚下,龙江人口巨降,于是,有些人甚至自己都以为自己生活在水深火热之中,妄自菲薄。生活不是GDP啊!是衣食住行。你们是穿得最多最精彩的,吃得是大块肉大扇排骨大盘子,住得房不值几个钱但宽敝明亮,行的自由任性不拥堵。
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